1.提取：（浸出、固液萃取）根據(jù)各種有效成分在溶劑中的溶解作用。對(duì)有效成分溶解度大，對(duì)不需要成分溶解度小的溶劑。浸提是通過(guò)溶劑與原料接觸，互相滲透、溶解、分配以及擴(kuò)散等一系列復(fù)雜過(guò)程而完成。
浸出溶劑的選擇:溶劑可分為水、親水性有機(jī)溶劑和親脂性有機(jī)溶劑。
一些常見(jiàn)溶劑的
親脂性的強(qiáng)弱順序如下：石油醚>苯>氯仿>乙酸乙酯>丙酮>乙醇>甲醇>水
提取設(shè)備:操作方式：間歇式、半連續(xù)式、連續(xù)式
溶劑和固體原料接觸的方式：多級(jí)接觸和微分接觸。
選擇設(shè)備:固體原料的形狀、顆粒的大小、物理性質(zhì)、處理難易等。
2萃取法（液-液萃取）:利用混合物中各成分在兩種互不相溶的溶劑中的分配系數(shù)的不同進(jìn)行分離的方法?？捎糜趶娜芤褐刑崛 ⒎蛛x、濃縮有效成分或除去雜質(zhì)。萃取時(shí)，各成分在兩相溶劑中分配系數(shù)相差越大則分離效率越高。萃取法的操作溫度低，適于對(duì)熱不穩(wěn)定成分的分離；
3.微波提取法:利用微波能進(jìn)行物質(zhì)萃取的一種新技術(shù)；
微波提取的原理和特點(diǎn):介于300MHz-30GHz（波長(zhǎng)在1cm-1m,介于紅外和無(wú)線電波之間）之間的電磁波提取過(guò)程中，微波加熱導(dǎo)致植物細(xì)胞內(nèi)的極性物質(zhì)吸收微波能，產(chǎn)生熱量，破壞細(xì)胞膜和細(xì)胞壁。
特點(diǎn)：投資少、設(shè)備簡(jiǎn)單、應(yīng)用范圍廣、無(wú)污染等
微波提取的裝置和條件:裝置包括：微波爐裝置和提取容器:提取效益：微波提取頻率、和時(shí)間
4.超聲波提?。豪贸暡ǎl率高于20KHz ）具有的機(jī)械效應(yīng)、空化效應(yīng)及熱效應(yīng)，通過(guò)增大介質(zhì)分子的運(yùn)動(dòng)速度、增大介質(zhì)的穿透力以提取生物有效分成的方法。提取原理（1）機(jī)械效應(yīng)：a.輻射壓強(qiáng)對(duì)物料有很強(qiáng)的破壞作用，使細(xì)胞組織變形、植物蛋白質(zhì)變性；b.產(chǎn)生摩擦力，使生物分子解聚，使細(xì)胞壁上的有效成分更快地溶解于溶劑中 (2) 空化效應(yīng):介質(zhì)內(nèi)部溶解了一些微氣泡，這些氣泡在超聲波的作用下產(chǎn)生振動(dòng)，當(dāng)聲壓達(dá)到一定值時(shí)，氣泡由于定向擴(kuò)散而增大，形成共振腔，然后突然閉合。產(chǎn)生的高壓，形成微激波，可造成植物細(xì)胞壁及整個(gè)生物體破裂，且在瞬間完成，利于有效成分的溶出。(3) 熱效應(yīng):聲能不斷被介質(zhì)的質(zhì)點(diǎn)吸收，介質(zhì)將所吸收能量的全部或大部分轉(zhuǎn)變成熱能，從而導(dǎo)致介質(zhì)本身和藥材組織溫度的升高，增大藥物有效成分的溶解度，加快有效成分的溶解速度。由于內(nèi)部溫度的升高
是在瞬間完成，可以使被提取成分的結(jié)構(gòu)和生物活性保持不變。
5.過(guò)濾利用多空性介質(zhì)阻留固體而讓液體通過(guò)，是固體與液體分離的方法。
天然產(chǎn)物傳統(tǒng)分離純化方法.過(guò)濾設(shè)備：加壓葉濾機(jī)真空過(guò)濾機(jī)
6.蒸發(fā)濃縮:蒸發(fā)：溶液表面的水或溶劑分子獲得的動(dòng)能超過(guò)溶液內(nèi)分子間的吸引力之后，脫離表面進(jìn)入空間的過(guò)程。影響因素：溫度、蒸發(fā)面積、蒸汽壓
7 沉淀
①鹽析利用不同物質(zhì)在高濃度的鹽溶液中溶解度不同來(lái)達(dá)到分離、提純的目的。
應(yīng)用：蛋白質(zhì)、多肽、多糖、核酸優(yōu)點(diǎn)：成本低，操作簡(jiǎn)便、安全，對(duì)許多生物活性物質(zhì)具有穩(wěn)定作用缺點(diǎn)：需脫鹽.影響鹽析的因素：離子強(qiáng)度、蛋白質(zhì)的性質(zhì)、pH、溫度鹽析方法加入固體鹽加入飽和溶液法透析平衡法
②有機(jī)溶劑沉淀:能與水互溶的有機(jī)溶劑對(duì)許多能溶于水的小分子天然產(chǎn)物以及
核酸、多糖、蛋白質(zhì)等生物大分子都發(fā)生能沉淀作用。
優(yōu)點(diǎn)：不用脫鹽，過(guò)濾比較容易；分辨能力比鹽析法高；生化制品生產(chǎn)中應(yīng)用比較廣泛。缺點(diǎn):對(duì)某些具有生物活性的分子(如酯)容易引起變性失活，操作常得在低溫下進(jìn)行。生化制品沉淀首先是能和水混溶，使用較多的是甲醇、乙醇、丙酮等。核酸、核苷酸、糖類和氨基酸等物質(zhì)，最常用的是乙醇，核酸的沉淀，異丙醇等也常被采用。蛋白質(zhì)和酶的沉淀，甲醇、乙醇和丙酮都可以。
③鉛鹽沉淀法:(堿式)醋酸鉛在水及醇溶劑中能與多種植物成分生成難溶的鉛鹽。
中性醋酸鉛有機(jī)酸、蛋白質(zhì)、氨基酸、酸性皂苷或部分黃酮類化合物等
堿式醋酸鉛除了上述能被中性醋酸鉛沉淀的成分外，還可以沉淀某些苷類、糖類及一些生物堿等堿性成分。
④酸堿沉淀法:利用某些成分在酸(或堿)中溶解、在堿(或酸)中沉淀的性質(zhì)達(dá)到分離的方法。如橙皮苷、蘆丁、甘草皂苷，均易溶于堿性溶液，當(dāng)加入酸后，可使之沉淀析出。物堿不溶于水，但遇酸可生成鹽類而溶于水中，再加堿堿化會(huì)重新生成游離的生物堿，從溶液中析出。其他方法：等電點(diǎn)沉淀、重金屬鹽沉淀等
8.結(jié)晶:物質(zhì)從液態(tài)或氣態(tài)形成晶體的過(guò)程。生成結(jié)晶的過(guò)程叫結(jié)晶生長(zhǎng)。
從比較不純的結(jié)晶，再通過(guò)結(jié)晶作用精制得到較純的結(jié)晶，這一過(guò)程叫再結(jié)晶。
結(jié)晶是在降低物質(zhì)溶解（度）量的基礎(chǔ)上。
結(jié)晶方法在原理上常分為兩大類：第一類：除去一部分溶劑；第二類：加入沉淀劑及降低溫度等方法。大致可分為：a.鹽析法：用于大分子蛋白質(zhì)、酶等；b.有機(jī)溶劑結(jié)晶法：小分子氨基酸等；c.等電點(diǎn)結(jié)晶法：多用于兩性物質(zhì)；d.其他：溫差法，加入金屬離子法等。
9.干燥:
氣流干燥:利用熱空氣與粉狀或顆粒狀濕物料在流動(dòng)過(guò)程中充分接觸，氣體與固體物料間進(jìn)行傳熱與傳質(zhì)，從而使?jié)裎锪线_(dá)到干燥的目的。
氣流干燥特點(diǎn)：干燥時(shí)間極短，一般1-5s。干燥強(qiáng)度大，生產(chǎn)能力大。天然產(chǎn)物傳統(tǒng)分離純化方法
沸騰干燥:利用流態(tài)化技術(shù)，即利用熱空氣使孔板上的粒狀物料呈流化沸騰狀態(tài)，使水分迅速汽化達(dá)到干燥目的。怎樣才能使粒子處于流態(tài)化？干燥時(shí)，使氣流速度與顆粒的沉降速度相等，當(dāng)壓力降與流動(dòng)層單位面積的質(zhì)量達(dá)到平衡時(shí)(此時(shí)壓力損失變成恒定)，粒子就在氣體中呈懸浮狀態(tài)，并在流動(dòng)層中自由地轉(zhuǎn)動(dòng)，流動(dòng)層猶如正在沸騰。
沸騰造粒干燥:利用流化介質(zhì)(空氣)與料液間很高的相對(duì)氣流速度，使溶液帶進(jìn)流化床就迅速霧化。這時(shí)液滴與原來(lái)在沸騰床內(nèi)的晶體結(jié)合，就進(jìn)行沸騰干燥，故也可看作是噴霧干燥與沸騰干燥的結(jié)合。
成粒：自我成粒、涂布成粒、粘結(jié)成粒
噴霧干燥:利用不同的噴霧器，將懸浮液和黏滯的液體噴成霧狀，形成具有較大表面積的分散微粒同熱空氣發(fā)生強(qiáng)烈的熱交換，迅速排除本身的水分，在幾秒至幾十秒內(nèi)獲得干燥。
霧化系統(tǒng):壓力式噴霧、氣流式噴霧、離心式噴霧
色譜分離技術(shù)
固定相：是色譜分離過(guò)程的一個(gè)固定介質(zhì)。
流動(dòng)相：在層析過(guò)程中，推動(dòng)固定相上待分離的物質(zhì)朝著一個(gè)方向移動(dòng)的液體、氣體或超臨界流體等都稱為流動(dòng)相。柱層析中一般稱為洗脫劑；薄層層析稱為展層劑。它是層析分離中的重要影響因素之一。
表示。保留時(shí)間：待分離物質(zhì)從進(jìn)樣開(kāi)始到組分流出濃度最大時(shí)所經(jīng)過(guò)的時(shí)間，用t
R
保留體積：待分離物質(zhì)從進(jìn)樣開(kāi)始到組分流出濃度最大時(shí)所用洗脫液的體積，稱為該組分的保留體積。
死時(shí)間：非保留溶質(zhì)從進(jìn)樣開(kāi)始到流出色譜柱所經(jīng)歷的時(shí)間，稱為死時(shí)間；
死體積：非保留溶質(zhì)從進(jìn)樣開(kāi)始到流出色譜柱所用的洗脫液的體積，稱為死體積；調(diào)整保留時(shí)間：某種物質(zhì)扣除死時(shí)間后的在色譜柱上的保留時(shí)間。
調(diào)整保留體積：某種物質(zhì)扣除死體積后的在色譜柱上洗脫所用的洗脫劑的體積。
容量因子：某一溶質(zhì)在色譜柱中任意位置達(dá)到平衡后，該溶質(zhì)在固定相中量和在流動(dòng)相中的量之比。
分配系數(shù)：在一定的條件下，某種組分在固定相和流動(dòng)相中含量（濃度）的比值，常用K 表示。
遷移率（比移值）:在一定條件下，在相同的時(shí)間內(nèi)某一組分在固定相移動(dòng)的距離與流動(dòng)相本身移動(dòng)的距離之比值，常用R f 表示。
遷移率和分配系數(shù)的關(guān)系？
塔板理論色譜柱的理論塔板數(shù)越大，塔板高度越小，色譜柱的分離效率越高。 分辨率（分離度）：相鄰兩個(gè)峰的分開(kāi)程度。
Rs=0.8:兩峰的分離程度可達(dá)89% Rs=1：分離程度98%Rs=1.5：達(dá)99.7%（相鄰兩峰完全分離的標(biāo)準(zhǔn)）
操作容量（交換容量）:在一定條件下，某種組分與固定相反應(yīng)達(dá)到平衡時(shí)，存在固定相上的飽和容量。
根據(jù)流動(dòng)相和固定相的極性程度，分為正相和反相色譜。
正相色譜：流動(dòng)相的極性小于固定相的極性，適用于極性化合物的分離。其流出順序是極性小的先流出，極性大的后流出。
反相色譜：流動(dòng)相的極性大于固定相的極性。它適用于非極性化合物的分離，其流出順序與正相色譜恰好相反。
根據(jù)流動(dòng)相的形式分類：液相層析：流動(dòng)相為液體的層析；氣相層析：流動(dòng)相為氣體的層析；
色譜分離技術(shù)--吸附色譜法原理吸附色譜為固定相與流動(dòng)相相對(duì)移動(dòng)過(guò)程中，溶質(zhì)和溶劑分子在吸附劑表面上的活性位點(diǎn)相互競(jìng)爭(zhēng)的吸附過(guò)程。
簡(jiǎn)單的說(shuō):依據(jù)吸附劑對(duì)混合物中各成分吸附性能的不同，使各成分得到分離。液-固吸附用得最多。
氧化鋁：由氫氧化鋁直接在高溫下脫水制得。
氧化鋁的吸附機(jī)理：表面有鋁醇基（Al-OH ）羥基的氫鍵作用而吸附化學(xué)物質(zhì)。氧化鋁的活性與含水量密切相關(guān)：
活化：在高溫下去除水分，含水量低，活性增強(qiáng)，稱為活化；
去活化：加入一定量的水，含水量高，活性降低。
硅膠通常用SiO 2 · xH 2O 表示，是一種堅(jiān)硬、無(wú)定型鏈狀和網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的硅酸聚合物顆
粒。內(nèi)部--硅氧交聯(lián)結(jié)構(gòu)--多孔結(jié)構(gòu)表面--硅醇基-氫鍵作用--吸附活性中心與極性化合物或不飽和化合物形成氫鍵;吸附的強(qiáng)弱與硅醇基的多少有關(guān)
色譜分離技術(shù)--吸附色譜法;硅醇基能通過(guò)氫鍵形成吸附水分，硅膠的吸附力隨吸水量的增加而降低；吸水量超過(guò)17%，吸附力較低不能用作吸附劑。
活化：一般指將硅膠在110℃加熱30min ，增強(qiáng)吸附能力。但當(dāng)溫度升高至500℃時(shí)，硅膠表面的硅醇基脫水縮合轉(zhuǎn)變?yōu)楣柩跬殒I，而喪失因氫鍵吸水的活性。
硅膠是一種酸性吸附劑，適用于中性或酸性成分的層析，如酚類、甾體和萜類等粒度越小，均勻性越好，分離效率越高；硅膠表面積越大，與樣品間的相互作用越強(qiáng)，吸附力越強(qiáng);同時(shí)硅膠又是一種弱酸性陽(yáng)離子交換劑，其表面上的硅醇基能釋放弱酸
性的氫離子，當(dāng)遇到較強(qiáng)的堿性化合物，則可因離子交換反應(yīng)而吸附堿性化合物。
聚酰胺:由有機(jī)酸和有機(jī)胺經(jīng)聚而成的高分子材料。聚酰胺分子上有許多酰胺基團(tuán)，形成活性中心。吸附屬于氫鍵吸附，極性物質(zhì)和非極性物質(zhì)都適用?；瘜W(xué)性質(zhì)很穩(wěn)定，不溶于水、醇、丙酮、氯仿、苯、正己烷等各種極性的與非極性的溶劑中。特別適合于對(duì)黃酮、酚類、醌類等物質(zhì)的分離
常用的有機(jī)溶劑極性由小到大的順序排列：
正己烷＜石油醚＜環(huán)己烷＜四氯化碳＜苯＜甲苯＜氯仿＜乙醚＜乙酸乙酯＜丙酮＜乙醇＜甲醇＜水＜乙酸＜甲酸
流動(dòng)相：?jiǎn)我蝗軇┒?、三元甚至多元溶劑組分
裝柱過(guò)程：關(guān)閉層析柱出水口，裝入1/3柱高的溶劑作緩沖液，并將處理好的吸附
劑等緩慢倒入柱中，使其沉降約3cm高。打開(kāi)出水口，控制適當(dāng)流速，使吸附劑等均勻沉降，并不斷加入吸附劑溶液。注意：不可干柱、分層，否則需要重新裝柱。
柱層析基本操作收集、鑒定及保存洗脫峰不一定能代表一個(gè)純凈的組分。在合并一個(gè)峰的各管溶液之前，還要進(jìn)行鑒定。
基質(zhì)的再生各種基質(zhì)的再生方法都有各自的方法根據(jù)不同的處理方法處理基質(zhì)再生。
吸附薄層層析薄層層析用的吸附劑與其選擇原則：和柱層析相同
主要區(qū)別在于：薄層層析要求吸附劑的粒度更細(xì)，一般應(yīng)小于10um，粒度均勻,用于薄層層析的吸附劑或預(yù)制薄層一般活度要求不宜過(guò)高。
大孔吸附樹(shù)脂:是一種不含交換基團(tuán)的、具有大孔結(jié)構(gòu)的高分子吸附劑?？孜綐?shù)脂多為白色的球狀顆粒，分為非極性、中性和極性三大類。常用的為苯乙烯型和丙烯腈型，在樹(shù)脂合成時(shí)根據(jù)需要引入極性基團(tuán)則成為極性樹(shù)脂從而增強(qiáng)吸附能力。大孔吸附樹(shù)脂的分離原理:由于吸附和篩選原理，有機(jī)化合物根據(jù)吸附力的不同及分子量的大小，在大孔吸附脂上經(jīng)一定的溶劑洗脫而分開(kāi)。
分配色譜:基于混合物各組分在固定相與流動(dòng)相之間的分配性質(zhì)不同而實(shí)施分離的
一種層析方法。分離各種化合物的本質(zhì)是化合物在兩相中因結(jié)構(gòu)不同而產(chǎn)生分配系數(shù)的差異。
固定相：一般用一種液體或多孔物質(zhì)牢固吸附和化學(xué)鍵結(jié)合的一種液膜作為固定相。色譜分離技術(shù)—分配層析法
紙層析固定相：濾紙纖維及其結(jié)合的水。流動(dòng)相：有機(jī)溶劑
遷移率和分配系數(shù)的關(guān)系？
雙向紙層析：適用于樣品所含溶質(zhì)較多或某些組分在單相紙層析中的Rf比較接近。
反相層析:固定相的極性小于流動(dòng)相，化合物流出色譜柱的順序是從大到小的色譜
過(guò)程稱為反相色譜，該色譜通常為分配色譜。固定相：一般以硅膠為基質(zhì)，鍵合C18等烷烴的非極性固定相。流動(dòng)相：甲醇、乙腈、水等。
液滴逆流層析基本原理：多個(gè)首尾相連的分配萃取管中填充固定相液，而使流動(dòng)相形成液滴通過(guò)此固定相液，在細(xì)的分配萃取管中與固定相液有效地接觸，不斷形成新的表面，從而促進(jìn)待分離混合物各組分在兩相溶劑之間的分配。
離子交換層析:以離子交換劑為固定相，依據(jù)流動(dòng)相中的組分離子與交換劑上的平
衡離子進(jìn)行可逆交換時(shí)的結(jié)合力大小的差別而進(jìn)行分離的一種層析方法。廣泛應(yīng)用于各種生化物質(zhì)如氨基酸、蛋白、核苷酸等的分離純化。
離子交換層析的原理:依據(jù)各種離子或離子化合物與離子交換劑的結(jié)合力不同而進(jìn)
行分離純化的。固定相：離子交換劑，它是由一類不溶于水的惰性高分子聚合物基質(zhì)通過(guò)一定的化學(xué)反應(yīng)共價(jià)結(jié)合上某種電荷基團(tuán)形成的。
